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什么是尖锐湿疣基因诊断

青岛百姓皮肤病医院在线咨询 发布时间:2017-09-04 21:35:48

  青岛百姓皮肤病医院专家讲述到:目前检查尖锐湿疣的措施不妨说五光十色,常常看见的是醋酸白实验、免疫组织学检查、病理检查等。这些措施有些科学、有些片面,那么什么是医学上的尖锐湿疣基因诊断呢?下面就对于这一诊断方式作详细的阐述:

什么是尖锐湿疣基因诊断

  1、标本的采集和预治理:用刮板或生理盐水浸润的棉棒从阴道和宫颈外口取分泌物和细胞在作细胞学检查的一同,将标本放入5ml含有0.05%硫柳汞的pbs中,用pbs离心(3000g10min)洗涤2次,沉淀细胞重悬于1mlpbs中,取0.5ml细胞悬液抽提dna;

  2、标本核酸的提取:按1体积细胞悬液加10倍体积的细胞裂解液,在37℃下治理过夜;且等体积酚/氯仿(1:1),氯仿/异戊醇(24:1)各抽提2次;加1/10体积3mol/l naac(ph 5.2)及2.5倍体积无水乙醇置-20℃ 2h或过夜沉淀dna;加1体积乙醇洗涤1次;用60μl含rna酶(100μg/ml)的te液(10mmol/l tris-hclph 8.0,1.0mmol/l edta)溶解dna,37℃温育30分钟。

  3、引物设计和合成:hpv基因组可分为早期区(e)和晚期区(l)每区含一系列开放读码框架(orf)。序列分析表明,各型hpv的非编码区及e1e6、e7和l1区均有保守序列。manos等从hpvl1区中选择保守序列设计合成引物my11和my09见表1该引物与hpv 6、11、1618及33型有互补序列,也可扩增其它型hpv。

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